Study of the fibrinolytic activity of serrapeptase and its in vitro thrombolytic effects

Abstract Serrapeptase, a proteolytic enzyme, has been used for the adjuvant treatment of many diseases. However, its fibrinolytic activity is still uncertain. Herein, the fibrinolytic activity of serrapeptase and its in vitro thrombolytic effects were investigated. The results showed that the fibrinolytic activity of serrapeptase was 1295 U/mg, and the specific activity was 3867 U/mg of protein when its proteolytic activity toward casein was 2800 U/mg. The optimum temperature and pH for serrapeptase activity were 37-40°C and 9.0, respectively. At 1 mmol/L, Zn2+, Mn2+ and Fe2+ could activate the fibrinolytic activity of serrapeptase, while K+, Cu2+, sodium dodecyl sulfate (SDS) and ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA) inhibited it. In vitro tests showed that serrapeptase could completely prevent blood coagulation at 150 U/mL, and the percentage of blood clot lysis reached 96.6% at 37°C after 4 h at 300 U/mL. These results indicate that serrapeptase has excellent fibrinolytic activity, and can be used as a health food or candidate drug for the prevention or treatment of thrombotic diseases.

Efeitos da aplicação de transglutaminase na fabricação do pão de forma / Effects of transglutaminase application on breadmaking

Este trabalho teve o objetivo de avaliar o efeito da adição da transglutaminase microbiana (MTGase) na fabricação de pão de forma, através do desenvolvimento de formulação ideal, com combinações de aditivos e enzima, e da avaliação do efeito da enzima nas proteínas, na massa crua, na massa após a fermentação e no produto final. Para comparar a qualidade dos pães produzidos com ou sem enzima, foram testadas três formulações: a básica, livre de aditivos (pão Zero); com a adição de emulsificante e ácido ascórbico (pão Controle); e a preparada com a formulação básica adicionada de enzima (pão MTGase). A avaliação da qualidade dos pães foi feita por meio de medidas físicas e instrumentais. A análise de textura foi realizada pelo método TPA (Texture Profíle Analysis), cujas respostas de firmeza, elasticidade, mastigabilidade e gomosidade podem ser correlacionadas com análises sensoriais. Paralelamente, de amostras de farinha, de massa e de pão foram obtidas as frações protéicas de gliadinas, gluteninas e os resíduos de extração. As gliadinas e as gluteninas foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa e por eletroforese em gel de poliacrilamida contendo SDS. Os resultados de volume e de firmeza dos diferentes pães apresentaram diferenças significativas a nível de 5%, em que as respostas do pão MTGase foram melhores que as do pão Zero, porém ainda inferiores às do Controle. A melhor formulação foi obtida por meio de um planejamento composto central, com variações nas concentrações de emulsificante, ácido ascórbico e enzima, com os resultados avaliados pela metodologia de superfície de resposta. Exceto para a coesividade, todos os outros parâmetros de volume, dureza (TA), firmeza, elasticidade, mastigabilidade e gomosidade (TPA) apresentaram resultados positivos pela ação da transglutaminase a 0,6%, combinada com 0,2 % de emulsificante e 70 ppm de ácido ascórbico. Os resultados sugerem que a enzima foi capaz de modificar as propriedades químicas das proteínas, o comportamento reológico da massa e as propriedades funcionais do pão, melhorando a força da massa, a textura e o volume dos pães. As análises das frações gliadínicas apresentaram cerca de 3% de Nitrogênio total, em base seca, e as frações glutenínicas apresentaram entre 2 e 5% de Nitrogênio total. Os perfis cromatográficos e eletroforéticos dessas frações sugerem que as gliadinas não foram afetadas pela presença da enzima, que envolveram sobretudo as gluteninas. O conjunto de resultados indica que a aplicação de MTGase em associação com aditivos convencionais pode ser uma alternativa à panificação, embora os mecanismos de sua ação na massa não estejam completamente esclarecidos

The application of microbial transglutaminase on weak gluten flour used in breadmaking was studied over the process. To verify the enzyme effects, three formulations were tested: Base formulation, characterized by the absence of enzyme and emulsifying agents; Control formulation, comprised by the presence of emulsifying agents and ascorbic acid and MTGase formulation, with the enzyme. Samples of flour, dough and bread were analyzed. The effect of enzyme on bread quality was estimated by parameters of Texture Analysis, Texture Profile Analysis and specific volume. The protein contents from those samples were determined by the total nitrogen in glutenin and gliadin fractions, that were also analyzed by RP-HPLC (reversed phase high performance liquid chromatography) and by SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis). Although the MTGase bread did not reach the same quality parameters as those achieved by the Control samples, it showed as an alternative formulation to reduce the quantity of emulsifying agents and ascorbic acid as compared to the Control. The results indicate that the enzyme modified chemical and functional properties of glutenin fraction, improving dough strength and bread volume. Results of total nitrogen content, and electrophoretic and chromatographic profiles of the protein fractions suggest that while glutenin proteins were modified by enzyme, gliadin proteins were not affected

Participación de las metaloproteasas de matriz extracelular en la ruputora prematura de membranas fetales: un modelo fisiopatogénico novedoso / Participation of metaloproteases of extracellular matrix in premature rupture of fetal membranes: a pyisiopathogenic model

Se aportan pruebas experimentales que involucran la participación de la familia de las metaloproteinasas de matriz extracelular en la génesis de la ruptura prematura de membranas. La expresión de este grupo de enzimas, que se presenta en condiciones normales durante el trabajo de parto aparecen en la RPM sin relación con la edad gestacional. Este fenómeno no se presenta como un ejemplo aislado de la participación de las metaloproteinasas en eventos ligados al trabajo de parto, ya que es bien conocida su participación en la maduración del cuello uterino que precede a la expulsión del producto, y que consiste en mecanismos semejantes a los que ahora se postulan para la maduración de las membranas fetales. La hipótesis de trabajo en condiciones patológicas, implica entoces la activación de un sistema normal en un momento inadecuado que resulta en ruptura prematura de membranas.

La caries dental: etiología y naturaleza. Primera parte / Dental caries: etiology and nature. First part

El presente estudio consiste en una revisión bibliográfica acerca de la caries dental; nuevos conceptos y factores etiológicos

Acción combinada del 2,4-D; 2,4,5-T y ametrina sobre la concentración de proteínas y actividad proteolítica hepática / Combined action of 2,4-D; 2,4,5-T and ametrine on the concentration of proteins and hepatic proteolytic activity

Se realiza el estudio en 30 ratas machos Wistar, distribuidas en 5 grupos: grupo control, grupo de la mezcla de ésterews del 2,4-D y 2,4,5-T, grupo del éster butílico del 2,4-D grupo de ametrina y la mezcla de todos ellos. Se inocularon por vía intragástrica en dosis de 1/10 DL50 para cada plaguicida, aislado, y 1/30 DL50 para cada plaguicida, en la mezcla, durante 3 semanas, 5 veces en cda una. Se controló el peso corporal, el hepático y se determinó la actividad proteolítica y la concentración de proteína en el tejido hepático. Se observó aumento de la respuesta tóxica en el grupo al que se le inoculó la mezcla, con pérdida de peso corporal, aumento de la actividad proteolítica específica y disminución de la concentración de proteína por gramo de tejido